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凯氏定氮法测定小儿智力糖浆中总氮含量

来源:本站  类别:技术文章  更新时间:2014-01-08 11:53:35  阅读
小儿智力糖浆是由龟甲、龙骨、远志、雄鸡、石菖蒲等中药组成的复方成药,具有开窍益智,调补心肾,滋养安神。用于心肾不足,痰浊阻窍所致的小儿多动,少语,烦躁不安,神思涣散,少寐健忘,潮热盗汗;儿童多动症见上述证候者。历年来雄鸡被民间作药食两用的滋补佳品,其特点是营养全面,肉质鲜美,具有很高的食疗滋补功效。它滋阴补肾、补气血、强身健体,对儿童智力的提高有着很好的功效。而雄鸡以及龟甲是动物类药材,含有蛋白质、多肽以及游离的氨基酸为其主要有效成分,故参考采用凯氏定氮法来测定处方中的总氮含量,以总氮量为指标进行含量测定来控制该处方中的动物药的质量。
1 仪器和试药
500 ml凯氏烧瓶,三角漏斗,石棉网,常量定氮法的蒸馏装置,500 ml锥形瓶,硫酸钾(或无水硫酸钠),硫酸铜,浓硫酸,锌粒,0.05 mol/L硫酸滴定,2%硼酸溶液,40%氢氧化钠, 甲基红-溴甲酚绿混合指示液(取0.1%甲基红的乙醇溶液20 ml加0.2%溴甲酚绿的乙醇溶液30 ml,摇匀即得);小儿智力糖浆。以上试剂、试药均为分析纯。
2 试验方法
2.1 消化:为了使所取样品更具有代表性,我们参照《中国药典》2005年版一部附录ⅨL第一法(常量法)。精密量取本品5 ml,置干燥的500 ml凯氏烧瓶中,依次加入硫酸钾(或无水硫酸钠)10 g和硫酸铜粉末0.5 g,再沿瓶壁缓缓加硫酸20 ml;在凯氏烧瓶口放一小漏斗并使烧瓶成45度斜置,用直火缓缓加热,使溶液的温度保持在沸点以下,等泡沸停止,强热至沸腾,待溶液成澄明的绿色后,继续加热30分钟,放冷,备用。
2.2 蒸馏:沿凯氏烧瓶壁缓缓加水250 ml,振摇使混合,放泠后,加40%氢氧化钠溶液75 ml,注意使沿瓶壁流至瓶底,自成一液层,加锌粒数粒,用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管连接;另取2%硼酸溶液50 ml,置500 ml锥形瓶中,加甲基红-溴甲酚绿混合指示液10滴;将冷凝管的下端插入硼酸溶液的液面下,轻轻摆动凯氏烧瓶,使溶液混合均匀,加热蒸馏,至接受液的总体积约为250 ml时,将冷凝管尖端提出液面,使蒸气冲洗约1分钟,用水淋洗尖端后停止蒸馏。
2.3 滴定:馏出液用稀硫酸滴定液(0.05 mol/L)滴定至溶液由蓝绿色变为灰紫色,即为滴定终点。并将滴定的结果用空白试验校正。每1 ml硫酸滴定液(0.05 mol/L)相当于1.401 mg的氮。
2.4 空白试验:不加样品,只加试剂,重复上述操作。
2.5 计算:总氮(N)量(mg/ml)=
V1—滴定时消耗硫酸标准溶液的体积(ml);V2—空白试验中消耗硫酸标准溶液的体积(ml);C—硫酸标准溶液的浓度。
3 结果
3.1 精密度试验:精密量取浓度为0.25 mol/L的(NH4)2SO4试液5ml,照上述方法进行测定,结果见表1。
3.2 重复性试验:精密量取小儿智力糖浆(批号0301)5 ml,共5份,按以上的操作方法测定,结果见表2。
3.3 加样回收试验:精密量取小儿智力糖浆(批号为0301,已测定含量,含氮量为3.00 mg/ml)5 ml,共6份,分别置干燥的500ml凯氏烧瓶中,再依次精密加(NH4)2SO4
试液(浓度为0.25 mol/L)2 ml按以上实验步骤操作,测定含氮的总量,计算回收率,测
定结果见表3。
3.4 样品的测定及限度的制定:根据10批样品测定结果(平行测定2份),结合大生产的实际操作等各种因素,暂拟定本品每ml含总氮量不得少于2.0 mg,见表4。
本法可准确测定样品中的含氮量, 如实反应处方投料,工艺的稳定性等,精密度、重现性、回收率良好。并对10批样品进行了含量测定,初步拟定小儿智力糖浆每ml含总氮量不得少于2.0 mg。因而该方法可以作为控制小儿智力糖浆含氮量一个可靠方法。
4 讨论
目前国内测定食品与中药中的总氮多用凯氏定氮法,该方法以其测定结果稳定,准确,被国内外广泛采用。含氮有机物在硫酸及催化剂的作用下, 经强烈分解后有机氮转化为硫酸铵,所以最理想的回收试验物质为硫酸铵。但是目前国内无硫酸铵基准物和化学对照品,定氮试验用于药物分析,所以硫酸铵的定量方法能以药典所收载的方法为最宜。本文内容中使用的硫酸铵只按照称重来定量,存在一定的不准确性,但精密度试验和回收率试验表明结果是可靠的。用凯氏定氮法检测其他样品总氮时, 同样要控制好消化时间,时间过短, 则样品未完全消化,致使结果偏低;时间过长,结果也会偏低,这可能是因为小部分氮随水蒸汽一起逸出引起的。
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