您现在的位置: 首页>>技术文章 >> ZDDN-II全自动凯氏定氮仪与本微量蒸馏法测定饲料中粗蛋白的比较

ZDDN-II全自动凯氏定氮仪与本微量蒸馏法测定饲料中粗蛋白的比较

来源:本站  类别:技术文章  更新时间:2014-01-10 11:49:58  阅读
ZDDN-II全自动凯氏定氮仪 采用微电脑进行过程控制,在自动模式下,能够一次完成加碱、加硼酸、蒸馏、氨气吸收整个过程,加硼酸和加碱的体积以及蒸馏和吸收过程的时间都可以自行设定。与用半微量蒸馏法测定饲料中的粗蛋白含量相比较,两者无论从操作过程,还是使用仪器,都有一定的差别,但是,其测定值的最大偏差却只有0.51%。这说明,用这两种测定方法,对饲料中的粗蛋白含量测定都有一定的可信度。也因此,全自动凯氏定氮仪,在现今实验室测定中,使用范围最广,使用频率最高,因为其测定粗蛋白结果快速、准备且可靠。下面,我们来具体分析下这两种测定方法的异同点,以便于我们更加深入了解这两种方法。
       蛋白质的测定,一直是测量技术中的焦点。2009年的三聚氰胺事件,也是为了提高蛋白质的含量而不惜牺牲商业道德的行业大秘密。三聚氰胺事件,到今天,已经渐渐淡去,但是关于食品中蛋白质的含量,还是能够拨动大家的心弦。具体实验操作如下,大家可自行对比下。
1  试验部分
1.1  仪器ZDDN-II全自动凯氏定氮仪、300ml消化管、凯氏烧瓶、半微量凯氏蒸馏装置、可调节电炉、容量瓶、移液管、分析天平、实验室用样品粉碎机、滴定管(10ml)、锥形瓶。
1.2  试剂  本实验所用试剂均系化学纯,水系蒸馏水。硫酸、混合催化剂(0.4g五水硫酸铜与6g硫酸钠,磨碎混匀)、40%和30%的氢氧化钠溶液、2%硼酸溶液、混合指示剂(0.1%甲基红乙醇溶液与0.5%溴甲酚绿乙醇溶液等体积混合)、盐酸标准溶液(0.02116mol/l与0.1047mol/l)、硫酸铵、6.86和4.00pH校正溶液。
1.3 试样的制备  本实验所用样品均来自于省饲料监察所抽检或委托送样(有种鸭配合饲料、仔鸡前期配合饲料、生长猪浓缩饲料、乳猪浓缩饲料、肉粉3批、羽毛粉).将实验用样品(通常1.0kg,用四分法缩减至250g)粉碎,存于密封瓶中,待用。
1.4步骤
1.4.1 ZDDN-II全自动凯氏定氮仪实验步骤
1.4.1.1样品处理  称取样品试其蛋白含量的高低而相应增减于消化管中,加入3~4g催化剂,混匀,加入10ml硫酸.将消化管置红外消化炉上,先在150~200℃下加热0.5 h,继续升温到600℃,再消化1.5~2h。直至溶液呈清亮透明。待样品液冷凉后,可用ZDDN-II全自动凯氏定氮仪进行蒸馏滴定。
1.4.1.2 样品测定  仪器的检查及参数的设定,检查各容器中溶液是否足够(标液、30%氢氧化钠、2%硼酸、蒸馏水),打开冷凝水管,开启电源开关,预热30min后,进行pH校正。用pH为6.86和4.00的两种标准液标定电极,待显示校正结果Slope:95%~105%以及Zoro Point pH:6.5~7.2即可进入起步阶段,进行仪器的初启动(可进行1~3次,着重在于检查仪器是否稳定)。设定空白、硫酸氨溶液及待测样品的参数(重量、方法、组数、编号等)设定好后进行空白溶液及硫酸氨溶液的测定,待硫酸氨校正值为21.19%±0.2%,进入样品检测。即放入已消化好的样品,即可自动蒸馏、滴定。并可根据仪器给出的标准酸消耗量进行计算。
1.4.2  半微量蒸馏法实验步骤
1.4.2.1  试样的消煮  称取试样1g准确至0.0002g,放入凯氏烧瓶中,加入4~6g混合催化剂,与试样混合均匀,再加入10ml硫酸和2粒玻璃珠,将凯氏置于电炉上加热,开始小火,待样品焦化,泡沫消失后,再加强火力(400?C)直至呈透明的蓝绿色,然后再继续加热,至少2h。同时进行空白的消煮。
1.4.2.2 半微量蒸馏法  将试样消煮液冷却,加入20ml蒸馏水,转入200ml容量瓶中,洗涤烧瓶3~5次,洗液并入容量瓶,冷却后用水稀释至刻度,摇匀,做为试样分解液。将凯氏烧瓶按蒸馏装置连好,在蒸汽发生器的水中加入甲基红指示剂数滴,硫酸娄滴,在蒸馏过程中保持此液为橙红色,否则需补加硫酸。并将冷凝管末端浸入装有20ml硼酸为吸收液和2滴甲基红–溴甲酚绿指示剂的锥形瓶内。准确移取试样分解液5ml注入蒸馏装置的反应室中,用少量蒸馏水冲洗进样入口,塞好入口玻璃塞,再加10ml氢氧化钠溶液,小心提起玻璃塞使之流入反应室,将玻璃塞塞好,且在入口处加水密封,防止漏气。蒸馏4min降下锥形瓶使冷凝管末端离开吸收液面,再蒸馏1min,用蒸馏水冲洗冷凝管末端,洗液均流入锥形瓶内,然后停止蒸馏。
1.4.2.3 硫酸氨的消煮  精确称取0.2g硫酸铵(称取前在105ºC烘箱烘2h),代替试样,按试样消煮步骤进行操作,测得硫酸铵含氮量为21.19±0.2%,否则应检查加碱、蒸馏和滴定各步骤是否正确。
1.4.2.4 滴定  将上述馏出液用0.02116mol/ml盐酸标准溶液滴定硼酸吸收液,至蓝绿色变为灰红色即为终点。记录盐酸溶液的用量,同时做一空白对照组。
1.5 结果计算
计算公式:
X(%)=(V1-V0)×C×0.0140×6.25/m×V'/V×100
式中:X——为试样中粗蛋白的含量.% ;
V1——滴定试样时所需标准溶液体积,ml;
V0——滴定空白时所需标准溶液体积,ml;
C——盐酸标准溶液浓度,mol/l;
m——试样质量,g;
V——试样分解液总体积,ml;
V'——试样分解液蒸馏用体积,ml;
0.0140——每毫克当量氮的克数;
6.25——氮换算成蛋白质的平均系数.
2.结论
ZDDN-II全自动凯氏定氮仪与半微量蒸馏法的优缺点比较
ZDDN-II全自动凯氏定氮仪
半微量蒸馏法
蒸馏速度:<5分钟/样品
半微量蒸馏法消化需要5~6h,在其过程中易煮干溶液
一次完成加碱、加硼酸、蒸馏,氨气吸收整个过程,加硼酸和加碱的体积以及蒸馏和吸收过程的时间都可以自行设定。
半微量蒸馏法的吸收液终点是用眼睛通过颜色变化进行突跃点的确定,难免出现人为的操作误差
按计算机设置的程序进行操作,消化好、冷却后即可按照设定的参数进行检测,自动完成,无需分布操作,提高工作效率
半微量蒸馏法在样品消化好后需进行转移、冷却、定容,测定的过程中需吸取,蒸馏好后需清洗3~4次,增多了工作时间,降低了工作效率。
@2009 http://www.dsddy.cn all rights reserved