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粗脂肪测定的两种方法比较

来源:本站  类别:技术文章  更新时间:2010-06-09 15:16:22  阅读
 

粗脂肪测定的两种方法比较

       粗脂肪是指饲料、动物组织、动物排泄物中脂溶性物质的总称。粗脂肪与脂肪概念不同,它涵盖的内容要远远大于脂肪。通常粗脂肪的测定,有抽提法和酸水解法,当然,现在还有更为方便的途径,那就是直接用粗脂肪测定仪,它有多种型号,如SZF-06B粗脂肪测定仪,SZF-06粗脂肪测定仪和SZF-06A粗脂肪测定仪

       下面我们来具体看下抽提法和酸水解法测定粗脂肪的原理、试剂仪器等相异之处。

原理:

抽提法:本法为重量法,用脂肪溶剂将脂肪提出后进行称量,该法适用于固体和液体样品。通常将样品浸于脂肪溶剂,为乙醚或沸点30℃至60℃的石油醚,借助于索氏提取器进行循环抽提。用本法提取的脂肪性物质为脂肪类物质的混合物,其中含有脂肪游离脂肪酸、磷脂酯、固醇、芳香油某些色素及有机酸等。因此,称为粗脂肪。

酸水解法:样品经酸水解后用乙醚提取,除去溶剂即得游离及结合脂肪总量。

试剂和仪器:

抽提法:无水乙醚、海砂、索氏提取器、恒温水浴锅、烘箱、脱脂棉花、脱脂滤纸

酸水解法:盐酸、95%乙醇、乙醚、石油醚、100毫升具塞刻度量筒

操作步骤:

抽提法:(一)样品的准备

    称取样品的重量根据材料中脂肪的含量而定,通常脂肪含量在10%以下的,称取样品10-12克;脂肪含量为50-60%的,则称取样品2-4克,(可以用测定水分后的样品)。

    将样品在80-100℃烘箱去水分。一般烘4小时,烘干时要避免过热。冷却后,准确地称取一定量样品,必要时,拌以精制海砂,无损地移入滤纸筒内,用脱脂棉塞严,将滤纸筒放人索氏提取器的提取管内,注意勿使滤纸筒高于提取管的虹吸部分。

    (二)抽取   

    将洗净的提取瓶在1.5℃烘箱内烘干至恒重,加乙醚约达到提取瓶容积的1/2-2/3,然后将提取器各部分按图连接,注意不能漏气。

    加热提取时,应在电热恒温水浴中进行(水浴温度约为40-50℃)也可以使用灯泡或电炉加热的水浴锅,严禁用火焰直接加热索氏提取器。

在加热时乙醚蒸发,乙醚蒸汽由连接管上升至冷凝器,凝结成液体滴入提取管中,此时样品内的脂肪为乙醚液面超过虹吸管高度后溶有脂肪的乙醚虹吸管流入提取瓶,为此循环抽提,调解水域温度,使乙醚每小时循环3-5次,提出时间视样品的性质而定,一般需6-12小时,样品含有脂肪是否提取完全,可以用滤纸来粗略判断,从提取管内吸取少量的乙醚并滴在净的滤纸上,待乙醚干后,滤纸上不留有油脂的半点则表示已经提取完全。

提取完全后,再将乙醚蒸到提取管内,待乙醚液面达到虹吸管的最高处以前,取下提取管。

(三)称重和计算

将提取瓶中的乙醚全部蒸干,洗净外壁,置于105℃烘箱干燥至恒重,按下式计算样品的促脂肪百分含量。

脂肪(﹪)=( W1-W0)/W×100

W1:接受瓶和脂肪重量(克)。

W:样品重量(克)。

W0:接受瓶重量(克)。

酸水解法:1、样品处理: (1)固体样品:精密称取约2克水,混匀后再加重。毫升盐酸。置于50毫升大试管内,加8毫升;(2)液体样品:称取10.0克,置于50毫升大试管内,加工0毫升盐酸,  

    2、将试管放70-80℃水浴中,每隔5-10分钟以玻璃棒搅拌一次,至样品消化完全为止,约40-50分钟。

    3、取出试管,加人10毫升乙醇,混合。冷却后将混合物移于100毫升具塞量筒中,以25毫升乙醚分次洗试管,一并倒人量筒中。待乙醚全部倒入量筒后,加塞振摇1分钟,小心开塞,放出气体,再塞好。静置12分钟,小心开塞,并用石油醚-乙醚等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。静置10-20分钟,待上部液体清晰,吸出上清液于已恒重的锥形瓶内,再加5毫升乙醚于具塞量筒内,振摇,静置后,仍将上层乙醚吸出,放入原锥形瓶内。将锥形瓶置水浴上蒸干,置95-105℃烘箱中干燥2小时,取出放入干燥器内冷却0.5小时后称重。

  计算: 

X=(m1-m0)/m2     

X:样品中脂肪的含量%;

m1:接受瓶与脂肪的质量,g;

m2:接受瓶的质量,g。

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